Descrição

A técnica de PCR em tempo real gera dados qualitativos e quantitativos. Permite a detecção e amplificação simultaneamente, ciclo a ciclo, com elevada sensibilidade e especificidade da intensidade de fluorescência emitida em decorrência da amplificação da sequência de DNA-¬alvo. O resultado é visualizado em tempo real, gerando dados quantitativos com maior precisão. Isso possibilita a análise comparativa da expressão do gene de interesse entre as amostras logo no início da fase exponencial de amplificação, em que não há saturação da amplificação, eliminando um viés da PCR convencional.
É importante observar que a eficiência das reações de amplificação depende de diversos fatores, como o cuidado nas pipetagens, a qualidade e integridade das amostras (molde de RNA e cDNA), desenho dos primers, condições de termociclagem (temperatura de desnaturação e de anelamento dos primers), qualidade e quantidade dos reagentes e também o tamanho do produto a ser amplificado. Condições específicas para cada experimento devem ser padronizadas. 
A técnica é utilizada para detecção de patógenos ou células/sequências específicas em misturas complexas, ou para analisar expressão gênica de um único alvo ou um painel (multiplex). 

Esta plataforma realiza ensaios de presença e ausência, quantificação absoluta, quantificação relativa e genotipagem por sondas TaqMan alelo-específicas e High Resolution Melting, em placas de 96 e 384 poços. Para isso, possuimos um robô de pipetagem que auxilia na preparação das placas. Como serviços, são oferecidos a execução de ensaios de microarranjos TaqMan TLDA (TaqMan Low Density Arrays) e diagnóstico molecular em pacientes portadores da doença de Chagas (Hospitais e Serviços de Saúde).