AM - Instituto Leônidas e Maria Deane

Endereço

Rua Terezina, - Adrianópolis, Manaus CEP: 69057070

Bioensaios de compostos Biotecnológicos -

A plataforma realiza a triagem de substâncias de todos os tipos e origem de amostras, que são testadas contra 13 cepas de bactérias gram-positivas, 24 Gram-negativas e 1 cepa de Candida albicans. Para esses grupos de microrganismos, são usados: estufa B.O.D, cabine de segurança biológica classe III (ESCD WORLD CLASS), incubadora shaker CE-720 (GLENLAB) e Espectrofotômetro Biodrop.

Serviços oferecidos
  • P10-006A : Antibiograma Clique para a descrição do serviço oferecido

    É um método utilizado para determinação da suscetibilidade de um micro-organismo em contato com uma “substância”. O método de difusão em ágar é realizado em placas de petri com camada dupla de ágar, onde são confeccionados os orifícios. Para esse teste é realizado um screening das “substâncias” em uma única concentração frente as bactérias de interesse, utilizando a técnica de difusão em ágar/poços.

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  • P10-006B : Concentração inibitória mínima Clique para a descrição do serviço oferecido

    O método de microdiluição em caldo, é realizado em placas de 96 poços com transferência seriada, promovendo uma diluição de base logarítimica 1:2 e a menor concentração da amostra capaz de inibir o crescimento bacteriano é indicada pelo corante azul remanescente da solução de resazurina, que sugere a não viabilidade das células e, consequentemente, a não-conversão à resorufina, na qual sua cor rosa representa viabilidade celular.

    Nesse teste pode ser realizado de duas formas: Primeiramente pode ser realizado apenas de amostras que apresentaram atividades frentes as bactérias testadas no teste de difusão em ágar ou realizar um screening das substâncias em quatro concentrações definida pela subunidade ou usuário frente as bactérias de interesse.

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  • P10-006C : Atividade bactericida e bacteriostático Clique para a descrição do serviço oferecido

    A realização desse experimento é feita mediante as “substâncias” que apresentarem atividades promissoras nos testes de Difusão em ágar e Concentração inibitória mínima. O teste é feito em apenas duas concentrações no máximo, a concentração utilizada é sempre as concentrações mínimas do teste de concentração inibitória mínima. O teste de curva de morte é realizado através de leitura de absorbância por espectrofotômetro UV-Visible (Shanghai Metash, Shanghai, China).

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  • P10-006D : Teste de citotoxicidade e viabilidade Clique para a descrição do serviço oferecido

    O método de citotoxicidade e viabilidade visa avaliar as “substancias” com baixo poder citotóxico, visando a seleção de alvos potenciais que teriam efeitos colaterais minimizados. Os ensaios são realizados pelo método Alamar Blue em placas de 96 poços.

    São avaliadas as viabilidades e citotoxicidades das “substancias”, frente as linhagens VERO (ATCC® CCL-81TM), HEP-2 (ATCC ® CCL-23), HELA (ATCC® CCL-2) e THP-1 (ATCC® TIB-202TM), a fluorescência é monitorada em leitor de microplaca (GloMax® Explorer). Nesse teste as “substancias” pode ser testada em concentração única ou diluições seriadas, a concentração são pré-estabelecidas pela subunidade ou usuário.

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  • P10-006E : Atividade Antiplasmodial in vitro Clique para a descrição do serviço oferecido

    O método de microdiluição, é realizado em placas de 96 poços com transferência seriada, promovendo uma diluição de base logarítimica 1:2 e a leitura da fluorescência da menor concentração da amostra capaz de inibir o crescimento anti-Plasmodium é feita no citômetro de fluxo BD FACSCanto II (BD Biosciences, San Jose, USA), no canal FL-1 com software Getting Started with BD FACSDiva™ e FlowJo™ versão 10. Nesse teste as “substancias” pode ser testada em concentração única ou diluições seriadas, a concentração são pré-estabelecidas pela subunidade ou usuário.

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